Microbiologia de Alimentos: Microrganismos, Doenças e Coleta de Amostras

O Laboratório de Microbiologia de Alimentos Profa Dra Ana Beatriz Alkmim Teixeira Loyola Onde podemos encontrar estes microrganismos no ambiente água Homem alimentos Ar e pó equipamentos animais superfície Transmissão por aerossóis Transmissão por gotículas Transmissão por contato direto Bactérias Unicelular Microscópico e Procarionte Doenças Microbianas de Origem Alimentar Ausência organelas Material genético disperso citoplasma Eubactéria Procarionte Bactérias Bactérias Morfologia Doenças Microbianas de Origem Alimentar Coco Bacilo Espiral Víbrião Bactérias Parede Celular Doenças Microbianas de Origem Alimentar Gram Φ Peptideoglicana LPS Gram Peptideoglicano Ácido Teicóico Coloração de GRAM Microrganismos Patogênicos de Interesse em Água e Alimentos Coliformes Totais 20 espécies entéricas e não entéricas Bastonetes Gram negativos aeróbios ou anaeróbios facultativos fermentador de lactose produção de gás 24 a 48h a 35oC Doenças Microbianas de Origem Alimentar Microrganismos Patogênicos de Interesse em Água e Alimentos Coliformes Fecais espécies entéricas TGI Escherichia Enterobacter Klebisiella Bastonetes Gram negativos aeróbios ou anaeróbios facultativos fermentador de lactose produção de gás 445 455 oC Doenças Microbianas de Origem Alimentar Microrganismos Patogênicos de Interesse em Água e Alimentos E coli espécie entéricas TGI Melhor indicador de contaminação fecal Bastonetes Gram negativos aeróbios ou anaeróbios facultativos fermentador de lactose produção de gás 445 455 oC Doenças Microbianas de Origem Alimentar Fungos Doenças Microbianas de Origem Alimentar Presença organelas DNA Eukarya e organismos multicelulares Eucarionte Fungos Eukarya e organismos multicelulares Fungos microscópicos Fungos macroscópicos Leveduras Fungos filamentosos Leveduras Fungos filamentosos Bolor ou Mofo Coleta das amostras EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS Avental Máscara touca luva Coleta das amostras EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS gelo caixa térmica isopor No text content found in this image Coleta das amostras Rasgar o picote no topo da bolsa Puxar as tiras laterais para abrir a bolsa sem tocar com as mãos na boca Encher a bolsa ate a marca de 100 mL Girar a parte amarela da bolsa em torno do arame 3 à 4 vezes Dobrar a ponta dos arames para manter a bolsa fechada Coleta água de Rio Sacobolsa coletor de água Coleta das amostras EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS gelo caixa térmica isopor frasco de plástico frasco âmbar ph metro Espécie de interesse Frasco de coleta Volume de amostra Preservação estocagem da amostra Prazo para análise Coliformes Totais E coli Bag ou frasco polietileno estéril 100 mL Refrigerar a 10oC 24h e 36h água tratada FICHA DE REQUISIÇÃO DE ANÁLISE Coleta de amostra FORM 002A REV 01 APROVAÇÃO DATA Cliente Endereço Bairro Cidade Telefone Data da Coleta Tipo de Coleta Simples Composta Amostra Ordem de Serviço Horário da Coleta Amostra Temperatura pH Condição Climática Sol Chuva Nublado Análises Hora de Chegada do Material ao Laboratório Responsável do Laboratório pela coleta Responsável da Empresa que Acompanhou a Coleta OBRIGATÓRIA A PRESENÇA DE UM RESPONSÁVEL PELA EMPRESA DURANTE A COLETA Diagnóstico Laboratorial httpsplataformabvirtualcombrAcervoPublica cao158968 CARNES Frutos do mar Frutos do mar Setor Microbiologia Métodos disponíveis para detecção ou contagem de coliformes Técnicas dos tubos múltiplos Técnica da membrana filtrante Teste de presença e ausência Teste de contagem em placas Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Quantitativo número mais provável NMP Tubos de Durhan 10 mL do meio Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Coliformes totais fecais e E coli Meio de cultura lauril sulfato triptose LST Enriquecimento produção de gás fermentação lactose Amostra 10 mL Incubação 24 horas à 35oC Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Cada tubo da série foi semeado com 10 mL da amostra 6 Tubos positivos Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Consultando a tabela do NMP o resultado da amostra analisada é de 69 microrganismos100 ml Tabela do NMP Número de Tubos Positivo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Microrganismos alvo100 ml 11 11 22 36 51 69 92 12 161 23 Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Coliformes fecais E coli Meio de cultura caldo E Coli EC Amostra 01 mL do LST Incubação 24 horas à 45oC Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial Coliformes fecais E coli Caldo EC Caldo LST Técnicas dos tubos múltiplos Diagnóstico Laboratorial E coli Meio de cultura Eosina Azul de metileno EMB Amostra 01 mL do EC Incubação 24 horas à 35oC httpsyoutube9xvjZTn6STo Agar Eosina azul de metileno Teague Lac colônias púrpura a verde metálico Lac colônias translúcidas Teste presença e ausência Diagnóstico Laboratorial Substrato cromogênico e fluorogênico Coliteste Amostra 100 mL Incubação 24 horas à 35oC Leitura ultravioleta UV Teste presença e ausência Diagnóstico Laboratorial Teste presença e ausência Diagnóstico Laboratorial Coloração amarela coliforme Coloração fluorescente Coliforme fecal Ecoli Coloração transparente negativo httpsyoutubeZ00tUA6qLV4 E coli espécie entéricas TGI Melhor indicador de contaminação fecal Bastonetes Gram negativos Técnica de Contagem em placa Plaqueamento em profundidade Diagnóstico Laboratorial Amostra Pour plate 10 mL Meio Plate count agar PCA httpsyoutubeZzfcslIV9t0 Técnica de Contagem em placa Plaqueamento em superfície Diagnóstico Laboratorial Amostra Espalhamento 01 mL Meio Plate count agar PCA httpsyoutubeaWUe0kgSBD8 Técnica de Filtração em Membrana Diagnóstico Laboratorial httpsyoutubeE8VN8EMdXy4 Métodos disponíveis para detecção ou contagem de fungos Técnica espalhamento plaquamento em superfície Incubação 22 a 25 oC por 5 dias Posição das placas tampa para cima Meio de Cultura Dichloran Rosa de bengala DRBC Dichloran 18 Agar glicerol 095 H2O Agar PCA com cloranfenicol Batata dextrose Diagnóstico Laboratorial