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NUTRIÇÃO BACTERIANA Crescimento das culturas bacterianas Fatores químicos e físicos necessários para o crescimento bacteriano Meios de cultura Inoculação e isolamento de bactérias Preparação dos meios de cultura Agradecimento Profa Ana Cecília Nastrini Delgado Dias ANA BEATRIZ ALKMIM TEIXEIRA LOYOLA analoyolaprofunabr Crescimento microbiano Aumento coordenado de todos os constituintes celulares aumento do tamanho de uma célula número de células em conseqüência da multiplicação celular CRESCIMENTO DE CULTURAS BACTERIANAS Nutrição Bacteriana Fissão Binária CRESCIMENTO MICROBIANO aumento do n de células Fissão binária uma célula dará origem a duas ao fim de um certo tempo Tempo de geração ou de duplicação É o intervalo de tempo necessário para a célula se dividir ou para que a população em uma cultura duplique em número composição do meio de cultura temperatura de incubação pH disponibilidade de água Escherichia coli 13 a 30 min Micobacterium tuberculosis 13 a 15 h Bactérias 13 h Curva de crescimento Bacteriano É a representação gráfica do crescimento bacteriano em um meio de cultura líquido e incubado em condições ambientais favoráveis à sua multiplicação durante um período de tempo Fases do crescimento microbiano crescimento da população de células ao longo do tempo logaritmo do nº de células por unidade de volume em função do tempo Progressão geométrica 2n no de gerações httpsyoutubefj0mHyO6wLE Fases do crescimento microbiano Lag período onde ainda não há um aumento significativo da população onde o número de organismos permanece praticamente inalterado culturas antigas choque térmico radiações produtos tóxico ou de meio rico para meio pobre Log ou exponencial células plenamente adaptadas absorvendo os nutrientes sintetizando seus constituintes crescendo e se duplicando A taxa de crescimento exponencial é variável de acordo com o tempo de geração do organismo em questão Geralmente procariotos crescem mais rapidamente que eucariotos Estacionária nutrientes escasseando e os produtos tóxicos estão tornandose mais abundantes o número de células que se divide é equivalente ao número de células que morrem Declínio A maioria das células está em processo de morte embora outras ainda estejam se dividindo A contagem total permanece relativamente constante enquanto a de viáveis cai lentamente CRESCIMENTO DE CULTURAS BACTERIANAS Nutrição Bacteriana Curva de Crescimento Representação gráfica do crescimento bacteriano em um meio de cultura durante um período de tempo Fase Lag ou Adaptativa Fase Log ou Exponencial Fase Estacionária Fase Declínio Tempo em horas Logarítimo do n de germes Crescimento exponencial de uma população microbiana em suspensão em meio líquido é caracterizado pela DUPLICAÇÃO DO NÚMERO DE CÉLULAS E POR CONSEGUINTE DA MASSA BIOMASSA FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Fatores Químicos Fontes de Carbono Nitrogênio Oxigênio Enxofre e Fósforo Fatores Físicos pH Temperatura e Atmosfera Gasosa pH ou Potencial de Hidrogênio Iônico é um índice que indica a acidez neutralidade e alcalinidade de um meio qualquer pH 65 a 75 pH ótimo é determinado para cada espécie Efeito dos fatores ambientais no crescimento pH concentração de íons hidrogênico medida da acidez ou alcalinidade de uma solução Microrganismos pH ótimo bactérias 4 a 9 fungos 5 a 6 protozoários 67 e 77 algas 4 a 85 Efeito dos fatores ambientais no crescimento Atmosfera gasosa FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Atmosfera Gasosa Aeróbio Anaeróbio Anaeróbio Facultativo Microaerófilo 1 a 15 O2 O2 Presença O2 Ausência O2 Presença ou Ausência O2 Aeróbio Anaeróbio Anaeróbio Facultativo Microaerófilo 1 a 15 O2 O2 O2 Presença O2 Ausência O2 Presença ou Ausência O2 Jarra de Anaerobiose H2 CO2 FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Temperatura Temperatura intermediária 25C e 40C Psicrófilos Mesófilos Termófilos Temperatura 15C e 20C Patógenos de importância clínica 30 a 37C Temperatura 40C e 60C Mínima menor temperatura onde a espécie é capaz de crescer Ótima temperatura onde a espécie apresenta melhor crescimento Máxima temperatura mais alta em que ainda é possível o crescimento da espécie Efeito dos fatores ambientais no crescimento Temperatura mínima ótima máxima Efeito dos fatores ambientais no crescimento Pressão osmótica isotônico hipertônico hipotônico MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana Meio de Cultura Substâncias utilizadas para fornecer nutrientes para o crescimento e multiplicação de microrganismos APLICAÇÃO Crescimento bacteriano Isolamento bacteriano Estudo da morfologia colonial Pesquisa de patogenicidade Pesquisa das características bioquímicas CULTURA é o microrganismo que cresce e se multiplica no meio de cultura COLÔNIA é o agrupamento de seres vivos da mesma espécie Pura apresenta só uma espécie de bactérias Mista apresenta mais de uma espécie de bactérias MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana CONSITÊNCIA OU ESTADO FÍSICO Meio Líquido nutriente em solução aquosa Meio Semi Sólido nutriente em ágar 05 a 08 Meio Sólido nutriente em ágar 1 a 2 Líquido Semi Sólido Sólido NATUREZA Meio Animado células vivas animais de laboratório Meio Inanimado provenientes de substâncias naturais ou sintéticas MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana BHI Caldo de Enriquecimento FUNÇÃO TIPOS Enriquecimento cultivo de espécies de microrganismos exigentes nutricionalmente que crescem em pequeno n na amostra Seletivo crescimento de uma espécie particular de microrganismo eou impedir o crescimento de outras espécies Diferencial diferenciar espécies de microrganismos pela diferença do aspecto da colônia ou pelas diferentes alterações do meio Tetrationato Fezes Caldo de Enriquecimento MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana Ágar Manitol Staphylococcus sp Ágar SS Salmonela e Shigella Chromagar Agar Sabouraud Fungos PREPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana 3 6 Controle de Qualidade 37C por 24 horas Armazenamento 4 a 8C 121C por 15 10 g 1000 mL X 200 mL 5 1 2 4 7 H20 destilada Homogeneizar Tamponar Distribuir em placas e tubos Condições estéreis Embalar e Identificar 8 9 Preparação de Meios de Cultura ADULTERAÇÃO EM ALIMENTOS httpspetagroufgbrn35870ossetealimentos maisadulterados Fonte Journal of Food Sciences Em salas no zoom formadas por alimentos adulterados responda Qual o tipo de adulteração Fala sobre o produto usado para essa adulteração É possível realizar exames para detectar essa adulteração
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crescimento Bacteriano É a representação gráfica do crescimento bacteriano em um meio de cultura líquido e incubado em condições ambientais favoráveis à sua multiplicação durante um período de tempo Fases do crescimento microbiano crescimento da população de células ao longo do tempo logaritmo do nº de células por unidade de volume em função do tempo Progressão geométrica 2n no de gerações httpsyoutubefj0mHyO6wLE Fases do crescimento microbiano Lag período onde ainda não há um aumento significativo da população onde o número de organismos permanece praticamente inalterado culturas antigas choque térmico radiações produtos tóxico ou de meio rico para meio pobre Log ou exponencial células plenamente adaptadas absorvendo os nutrientes sintetizando seus constituintes crescendo e se duplicando A taxa de crescimento exponencial é variável de acordo com o tempo de geração do organismo em questão Geralmente procariotos crescem mais rapidamente que eucariotos Estacionária nutrientes escasseando e os produtos tóxicos estão tornandose mais abundantes o número de células que se divide é equivalente ao número de células que morrem Declínio A maioria das células está em processo de morte embora outras ainda estejam se dividindo A contagem total permanece relativamente constante enquanto a de viáveis cai lentamente CRESCIMENTO DE CULTURAS BACTERIANAS Nutrição Bacteriana Curva de Crescimento Representação gráfica do crescimento bacteriano em um meio de cultura durante um período de tempo Fase Lag ou Adaptativa Fase Log ou Exponencial Fase Estacionária Fase Declínio Tempo em horas Logarítimo do n de germes Crescimento exponencial de uma população microbiana em suspensão em meio líquido é caracterizado pela DUPLICAÇÃO DO NÚMERO DE CÉLULAS E POR CONSEGUINTE DA MASSA BIOMASSA FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Fatores Químicos Fontes de Carbono Nitrogênio Oxigênio Enxofre e Fósforo Fatores Físicos pH Temperatura e Atmosfera Gasosa pH ou Potencial de Hidrogênio Iônico é um índice que indica a acidez neutralidade e alcalinidade de um meio qualquer pH 65 a 75 pH ótimo é determinado para cada espécie Efeito dos fatores ambientais no crescimento pH concentração de íons hidrogênico medida da acidez ou alcalinidade de uma solução Microrganismos pH ótimo bactérias 4 a 9 fungos 5 a 6 protozoários 67 e 77 algas 4 a 85 Efeito dos fatores ambientais no crescimento Atmosfera gasosa FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Atmosfera Gasosa Aeróbio Anaeróbio Anaeróbio Facultativo Microaerófilo 1 a 15 O2 O2 Presença O2 Ausência O2 Presença ou Ausência O2 Aeróbio Anaeróbio Anaeróbio Facultativo Microaerófilo 1 a 15 O2 O2 O2 Presença O2 Ausência O2 Presença ou Ausência O2 Jarra de Anaerobiose H2 CO2 FATORES QUÍMICOS E FÍSICOS NECESSÁRIOS PARA O CRESCIMENTO BACTERIANO Nutrição Bacteriana Temperatura Temperatura intermediária 25C e 40C Psicrófilos Mesófilos Termófilos Temperatura 15C e 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Bacteriana CONSITÊNCIA OU ESTADO FÍSICO Meio Líquido nutriente em solução aquosa Meio Semi Sólido nutriente em ágar 05 a 08 Meio Sólido nutriente em ágar 1 a 2 Líquido Semi Sólido Sólido NATUREZA Meio Animado células vivas animais de laboratório Meio Inanimado provenientes de substâncias naturais ou sintéticas MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana BHI Caldo de Enriquecimento FUNÇÃO TIPOS Enriquecimento cultivo de espécies de microrganismos exigentes nutricionalmente que crescem em pequeno n na amostra Seletivo crescimento de uma espécie particular de microrganismo eou impedir o crescimento de outras espécies Diferencial diferenciar espécies de microrganismos pela diferença do aspecto da colônia ou pelas diferentes alterações do meio Tetrationato Fezes Caldo de Enriquecimento MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana Ágar Manitol Staphylococcus sp Ágar SS Salmonela e Shigella Chromagar Agar Sabouraud Fungos PREPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Nutrição Bacteriana 3 6 Controle de Qualidade 37C por 24 horas Armazenamento 4 a 8C 121C por 15 10 g 1000 mL X 200 mL 5 1 2 4 7 H20 destilada Homogeneizar Tamponar Distribuir em placas e tubos Condições estéreis Embalar e Identificar 8 9 Preparação de Meios de Cultura ADULTERAÇÃO EM ALIMENTOS httpspetagroufgbrn35870ossetealimentos maisadulterados Fonte Journal of Food Sciences Em salas no zoom formadas por alimentos adulterados responda Qual o tipo de adulteração Fala sobre o produto usado para essa adulteração É possível realizar exames para detectar essa adulteração