Características Gerais dos Fungos e sua Importância Ecológica e Industrial

109 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA Unidade II 5 MICOLOGIA GERAL 51 Característica gerais dos fungos São conhecidas mais de 100 mil espécies de fungos no entanto apenas cerca de 200 são consideradas patogênicas aos seres humanos e aos animais Na ultima década a incidência de infecções fúngicas importantes tem aumentado Essas infecções estão ocorrendo em unidades de cuidados da saúde e em indivíduos imunocomprometidos Além disso milhares de doenças causadas por fungos afetam plantas economicamente importantes causando prejuízos de mais de um bilhão de dólares ao ano Os fungos de forma especial são importantes na cadeia alimentar uma vez que decompõem a matéria vegetal morta reciclando assim elementos vitais Os seres humanos utilizam os fungos para o consumo cogumelos e na produção de alimentos pão e ácido cítrico e fármacos álcool e penicilina Ao estudo dos fungos denominamos micologia Inicialmente estudaremos as estruturas que servem de base para a identificação fúngica Em seguida exploraremos seus ciclos de vida e suas necessidades nutricionais Os fungos normalmente são conhecidos por serem causadores de um número bastante significativo de doenças tanto em pacientes imuncompetentes quanto em pacientes imunocomprometidos o que muitos esquecem no entanto é que os fungos também são organismos extremamente importantes para o meio ambiente e para a indústria de uma maneira geral Trataremos mais adiante das características patogênicas dos fungos no momento abordaremos suas características gerais e o seu papel benéfico para a população Os fungos são organismos eucariontes portanto apresentam uma organização típica desses organismos compreendida essencialmente pela sua organização celular com a presença de núcleo e de membrana nuclear envolvendoo Fungos foram durante muito tempo classificados como integrantes do reino Plantae no entanto hoje estão classificados separadamente no chamado reino Fungi Os fatores que fizeram com que os fungos fossem agrupados no reino Fungi são basicamente aqueles que os diferenciam das plantas Inicialmente podese citar sua incapacidade em produzir pigmento fotossintético como a clorofila a ausência de celulose como constituinte de sua parede celular e o não armazenamento de amido a maior parte apresenta a propriedade de armazenar glicogênio o que os aproxima mais das células animais do que das vegetais 110 Unidade II São organismos heterotróficos ou seja não são capazes de produzir seu próprio alimento e se alimentam da matéria orgânica Matéria orgânica normalmente que serve para nutrir esses microrganismos pode ser em sua maioria a matéria orgânica em decomposição normalmente de cadáveres e restos de animais e plantas por isso é comum nos referirmos aos fungos como seres saprófitas que em conjunto com as bactérias são responsáveis pela reciclagem de nutrientes na natureza e de acúmulo de resíduo orgânico Os fungos podem colonizar seres vivos de qualquer espécie humana vegetal e animal São encontrados em grande proporção no solo colaborando nos ciclos dos elementos e sendo facilmente dispersos pelo ambiente através do ar poeira insetos água homem animais e vetores de toda espécie Os fungos podem se constituir de uma única célula portanto com um único núcleo dessa forma caracterizam o que chamamos de levedura ou a partir de uma formação multicelular multinuclear como base para a formação de hifas e micélios que constituem os fungos filamentosos ou também conhecidos como bolores Os fungos são geralmente adaptados a ambientes que poderiam ser hostis às bactérias São encontrados na superfície de alimentos formando colônias algodonosas e coloridas Todavia diferem das bactérias em determinadas necessidades ambientais e nas características estruturais e nutricionais apresentadas a seguir Apresentam a parede celular com presença de substâncias quitinosas e células com organelas membranosas mitocôndrias complexo de Golgi vacúolo Não possuem células móveis em todos os estágios do ciclo de vida Reservam energia na forma de glicogênio Crescem normalmente em ambientes em que o pH é muito ácido desfavoráveis para o crescimento da maioria das bactérias comuns Quase todos possuem forma aeróbica Algumas leveduras são anaeróbicas facultativas A maioria dos fungos é mais resistente à pressão osmótica que as bactérias muitos consequentemente podem crescer em altas concentrações de açúcar ou sal Podem crescer sobre substâncias com baixo grau de umidade geralmente tão baixo que impede o crescimento de bactérias Necessitam de menos nitrogênio para um crescimento equivalente ao das bactérias São capazes de metabolizar carboidratos complexos como lignina madeira diferentemente das bactérias que não podem utilizálos como nutriente 111 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA As características citadas anteriormente nos mostram que os fungos se desenvolvem em substratos diversos como paredes de banheiro couro de sapatos e jornais velhos Réticulo Réticulo endoplasmático endoplasmático Aparelho de Golgi Aparelho de Golgi Mitocôndrias Mitocôndrias Membrana plasmática Parede celular Figura 43 Organização da célula fúngica Entre os constituintes celulares mais importantes destacamse parede celular membrana plasmática núcleo mitocôndrias retículo endoplasmático aparelho de Golgi complexo de Golgi Entre os constituintes celulares mais importantes destacamse a parede celular b membrana citoplasmática c citoplasma d núcleo e ribossomos f mitocôndrias g reticulo endoplasmático h aparelho de Golgi complexo de Golgi A parede celular é notoriamente reconhecida por sua característica rígida formada por substâncias diversas como mananas glucanas e quitina esta especialmente reconhecida por fazer parte do exoesqueleto de invertebrados na estrutura dos fungos encontrase em maior quantidade constituindo bolores e em menor nas leveduras A membrana citoplasmática é estrutura responsável por atuar como uma barreira semipermeável além de atuar no transporte de substâncias seja de forma ativa seja de forma passiva para o ambiente intra e extracelular É formada basicamente por lipídios e proteínas os lipídios se revelam sua verdadeira fonte estrutural e as proteínas conferem ao fungo inúmeras enzimas responsáveis por suas atividades metabólicas O núcleo abriga o material genético fúngico encerrado dentro do nucléolo constituído por DNA de fita dupla RNA e proteínas Os ribossomos são responsáveis pela síntese de proteínas nas mitocôndrias presentes no citoplasma celular ocorrem os processos de fosforilação oxidativa importantes para a síntese de ATP O retículo endoplasmático encontrase distribuído por toda a célula ligado sobretudo à membrana plasmática abriga grandes quantidades de ribossomos responsáveis pela síntese de proteínas 112 Unidade II O aparelho ou complexo de Golgi assim descrito é uma organela responsável pelo armazenamento de substâncias que serão secretadas pela célula bem como pelo transporte de substâncias até a membrana As leveduras são reconhecidas por serem microscópicas ovaladas e podem ser visualizadas sob microscopia óptica comum podendo ser vistas isoladas formando blastoconídeos ou pseudohifas Coramse por técnica de Gram como Grampositivas suas colônias normalmente têm aspecto mucoide de consistência cremosa ou pastosas Sua reprodução ocorre basicamente de forma assexuada por divisão binária eou brotamentofissão Na divisão binária a célula mãe se divide ao meio formando duas leveduras idênticas uma a outra Na reprodução por brotamentofissão a partir de uma célula mãe formamse brotos que podem se separar por processo de fissão ou permanecer integrados à célula mãe nesse caso dão origem à formação do que se considera uma pseudohifa cujo conjunto forma o que pode ser denominado de pseudomicélio Figura 44 Levedura em processo de brotamento blastoconídeo Figura 45 Levedura em formação de pseudohifa 113 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA Os fungos filamentosos são constituídos de forma bem mais complexa em linhas gerais iniciamse a partir da formação de um complexo celular em forma de tubos denominados de hifas essas hifas podem ser classificadas morfologicamente pela presença ou ausência de divisões internas também conhecidas como septos Respectivamente hifas septadas ou cenocíticas ainda podem ser hialinas ou demáceas se apresentarem ou não coloração característica As hifas hialinas são incolores eou transparentes enquanto as hifas demáceas apresentam coloração acastanhadaamarronzada Figura 46 Ilustração de hifa cenocítica O conjunto de hifas é denominado de micélio que se desenvolve em duas partes uma é responsável pela sustentação e captação de nutrientes e normalmente se estabelece no interior do substrato ou meio de cultura a outra o micélio aéreo ou reprodutivo abriga os órgãos de reprodução que podem ser denominados de propágulos conídeos eou esporos a depender da classificação grupo gênero e espécie a que pertence o fungo em questão e que são responsáveis pelo aspecto embolorado reconhecido por exemplo na superfície dos alimentos Tais fungos não são responsáveis unicamente por causar prejuízo ou malefícios ao contrário várias espécies de fungos filamentosos têm sido utilizadas nos diferentes segmentos da indústria tanto para a produção como para o beneficiamento de produtos como o Agaricus campestris e o Lentinus edodes conhecidos respectivamente como champignon e shitake os quais vêm sendo amplamente utilizados na gastronomia atual o Penicillium roqueforti utilizado na produção do queijo roquefort e o Penicillium camembertii utilizado na fabricação do queijo camembert Observação O Penicillium precisa de um teor de eh Aa pH e temperatura específicos para se desenvolver É positivo pois o bolor é aeróbio o pH ideal é de 45 a 67 para Aa é necessário 080 pois é deteriorante a temperatura ideal é de 13C e a umidade de 9394 Muitas leveduras também têm sido utilizadas pela indústria alimentícia como a Saccharomyces cerevisae empregada na produção de pães roscas bolos etc Utilizadas como fermento elas conferem à massa leveza e maciez e podem ser utilizadas na produção de bebidas alcoólicas como cerveja uísque e saquê no vinho o fungo utilizado é o Saccharomyces ellipsoideus 114 Unidade II Observação Voce sabia que muitos biomédicos vêm sendo empregados pela indústria de alimentos por seu conhecimento de microbiologia Eles podem atuar não só no desenvolvimento de novos produtos como também nos ensaios de qualidade Lembrete Além de sua importância na indústria alimentícia a importância do fungo na indústria farmacêutica é notória O primeiro antibiótico foi obtido dos fungos mais precisamente do gênero Penicillium spp dando origem à penicilina amplamente utilizada e cujos derivados coexistem até hoje Os fungos são subdivididos em filos basicamente coexistem quatro filos distintos a saber Ascomycota constituído por fungos formados por hifas septadas Seu principal constituinte é o asco uma estrutura semelhante a uma bolsa ou saco responsável por abrigar em seu interior os esporos órgãos de reprodução sexuados Algumas espécies podem apresentar órgãos de reprodução assexuados denominados de conídeos tanto os esporos quanto os conídeos podem apresentar forma tamanho e cor bastante variáveis na observação microscópica de fungos filamentosos podem contribuir para o diagnóstico laboratorial A grande maioria dos fungos causadores de infecções patogênicas e oportunistas encontrase encerrada nesse filo Basidyomicota é o grupo em que estão concentrados os fungos considerados comestíveis Zygomicota são fungos decompositores de plantas insetos e outros animais Já foram descritas mais de 100 espécies distintas e o Brasil já catalogou cerca de 10 destas Eles têm sido bastante estudados são associados a processos de reciclagem biológico e decomposição Oomycota abriga mais de 700 espécies tipicamente habitantes de ambientes aquáticos um dos representantes mais importantes é o Rinospporidium seeberi responsável por processo patogênico conhecido como rinosporidiose responsável pelo acometimento de tecido subcutâneo principalmente da mucosa ocular e nasal 6 BIOLOGIA DOS FUNGOS PATOGÊNICOS E CARACTERÍSTICAS GERAIS DAS MICOSES Os fungos como dito anteriormente são organismos saprófitos heterotróficos estabelecendo relações simbiontes ou parasitárias com seus hospedeiros São halofílicos tolerando elevadas concentrações de sal e se adaptam a pequenas variações de temperatura podendo ser classificados como psicrófilos quando se adaptam melhor em temperatura abaixo de 20 C fungos mesófilos preferem temperatura entre 20 C e 40 C termófilos preferem temperatura acima de 40 C 115 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA São aeróbios estritos e alguns podem crescer em anaerobiose anaeróbios facultativos O crescimento em meio de cultura é considerado lento sobretudo na forma de fungo filamentoso bolor Requerem em linhas gerais para melhor isolamento meios sólidos os quais possibilitarão a formação de micélio vegetativo Embora fundamental para a vida a ação dos fungos frequentemente pode causar transtornos já que podem atacar qualquer material orgânico disponível No ser humano alguns fungos causam doenças tipicamente conhecidas como micoses As micoses podem ser classificadas de acordo com o local de infecção e gravidade dos sinais e sintomas associados dispondose como a superficiais b cutâneas c subcutâneas d sistêmicas eou profundas As micoses ditas superficiais são aquelas cuja principal característica é acometer as camadas mais superficiais da pele eou dos pelos normalmente não causam lesões ou feridas sensíveis eou dolorosas são um problema sob aspectos estéticos e sociais Tais micoses estão associadas à presença de manchas em razão de seus agentes em sua maioria interferirem na melanogênese pela produção de ácido azaleico muitos deles são lipofílicos demandando alto teor de gordura água e umidade para poderem se adaptar e se multiplicar razão pela qual em situações de cultura não é raro adicionarmos ao preparo do meio de cultura substâncias como azeite de oliva Entre os principais agentes fúngicos causadores de micoses superficiais destacamse Malassezia furfur Piedraia hortae Phaeoannellomyces weneckii Trichosporon ovoides Trichosporon inkinn T mucoides As micoses cutâneas também conhecidas como dermatomicoses são aquelas tipicamente localizadas em maior extensão sobre a pele pelos e unhas podendo atingir o couro cabeludo e o pavilhão interno do ouvido As dematomicoses podem apresentar características antropofílicas quando da transmissão homem a homem zoofílicas animalhomem geofílicas pela manipulação direta do homem com o solo onde o fungo pode ter seu habitat As doenças fúngicas típicas de dermatófitos são descritas como tineas afecção de pelos eou cabelos onicomicoses micose de unha otomicoses micose de ouvido pele glabra irritação da pele pele de assadura lesões interdigitopalmares e interdigitoplantares conhecidas popularmente pelo nome de frieira ou pé de atleta Os fungos descritos como dermatófitos de maior relevância clínica apresentamse divididos em três gêneros principais a saber Microsporum spp Tricophyton spp e Epidemophyton spp As micoses subcutâneas caracteristicamente são conhecidas por serem encontradas na pele e tecidos subcutâneos muitas são de características ocupacionais atingindo sobretudo trabalhadores de áreas rurais A grande maioria destas ocorre por traumas físicos perfurações mordeduras e arranhaduras sobretudo com materiais contaminados como vegetais madeiras além da picada de insetos As micoses sistêmicas são originadas principalmente pela inalação de propágulos eou conídeos presentes no meio ambiente Os fungos normalmente associados a essas infecções são em sua maioria 116 Unidade II fungos dimórficos e saprófitas que em certas condições liberam conídeos reprodução assexuada os quais são inalados pelo homem e por animais Outra característica importante das micoses sistêmicas é que são endêmicas de regiões de clima quente e úmido tropical Os fungos apresentam fatores de virulência bastante individualizados e inerentes a cada espécie e não se aventa a possibilidade de contágio direto ao simples contato com pessoa infectada Os agentes mais comumente associados são Paracoccidioides brasiliensis Coccidioides immitis Blastomyces dermatitidis e Histoplasma capsulatum As micoses oportunistas normalmente ocorrem por ação de agentes fúngicos na maioria saprófitas e em linhas gerais não são consideradas patogênicas devendo haver correlação da clínicalaboratório As infecções são comuns em pacientes imunocomprometidos e a maioria das doenças é causada quando há comprometimento das barreiras naturais de defesa do hospedeiro como antibioticoterapia e granulocitopenia prolongada no tratamento de câncer e transplantados Entre os agentes fúngicos causadores de micoses oportunistas podemos destacar Cryptococcus neoformans Candida albicans Aspergillus spp Penicillium spp 61 Micoses superficiais aspectos clínicos e laboratoriais Pitiríase Versicolor Tinea versicolor O agente etiológico dessa infecção é conhecido como Malassezia furfur uma levedura lipofílica que faz parte da microbiota normal da pele especialmente das áreas mais ricas em ácidos graxos como o couro cabeludo Sob determinadas condições esse fungo passa de simples habitante comensal a patógeno causando quadro clínico compatível com infecção leve e em alguns casos crônica do estrato córneo caracterizada por máculas despigmentadas em tórax abdome e braços que podem descamar É uma infecção normalmente benigna e que raramente produz quadro de fungemia É considerada uma doença de distribuição universal cosmopolita clima tropical e subtropical com maior incidência em adolescentes e adultos jovens não havendo distinção por sexo eou grupo étnico A infecção é favorecida por fatores exógenos como temperatura e umidade relativa do ar elevadas e por fatores endógenos como pele gordurosa elevada sudorese fatores hereditários e uso de imunossupressores e cosméticos Clinicamente observamse lesões maculosas e descamativas de coloração variável que se distribuem com maior frequência nos braços tronco e região da cintura escapular e podem produzir aspecto estético desagradável A infecção ocorre com maior predileção nas áreas cobertas do corpo onde tradicionalmente ocorrem maior produção e excreção de gordura Quando expostas à intensa luz solar as leveduras produzem e secretam ácido azeláico o qual interfere diretamente na melanogênese O diagnóstico clínico pode ser realizado pela simples observação das áreas afetadas com o auxílio da lâmpada de Wood que revela áreas descamativas com típico padrão de fluorescência 117 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA O diagnóstico laboratorial pode ser realizado pela observação em escamas de pele de leveduras com brotamento associadas ou não a hifas curtas e tortuosas a partir do exame direto utilizandose de solução de KOH a 10 e tinta Se necessária a realização de cultura deve ser realizada utilizandose de meios especiais para fungos lipodependentes no caso podese utilizar de Agar sabouraud acrescido de azeite de oliva A amostra deve ser incubada a 37 ºC por três a seis dias As colônias típicas de Malassezia furfur deverão apresentarse com aspecto glabroso relevo rugoso de coloração variando do amarelo ao creme Figura 47 Exame direto em KOH 10 e tinta revelando presença de hifas e leveduras típicas de infecção por Malassezia furfur Tinea Nigra O agente etiológico é conhecido pelo nome de Exophiala werneckii eou Phaeoannellomyces werneckii É um fungo demáceo causador de uma micose crônica relacionada a climas tropicais e subtropicais mais frequente em mulheres Assim como a Pitiríase versicolor é uma infecção de característica estética superficial benigna não contagiosa típica de localidades que apresentem altas temperaturas 25 a 30 ºC o fungo é muito bem adaptado proliferandose sob restos de vegetais solo esgoto Suporta altas concentrações de sal halofílicos sendo isolado de habitats marinhos e em pescados secos e salgados Clinicamente apresentase como uma mancha acastanhada ou marromescura arredondada não descamativa com bordas delimitadas podendo apresentar discreta elevação Não há resposta inflamatória o paciente portanto não refere dor edema ou outro sinal típico desse processo Para o diagnóstico preconizase o exame direto com KOH 1040 em que se notará a presença de hifas curtas ramificadas septadas acastanhadas Se realizada em cultura apresenta crescimento bastante lento levando de um a três semanas em temperatura ambiente Suas colônias apresentamse de coloração negra ou verdeoliva com textura glabrosa e relevo cerebriforme 118 Unidade II Figura 48 Imagem de Exophiala werneckii eou Phaeoannelomyces wernecki Piedra branca e piedra negra O agente etiológico associado à infecção conhecida como piedra branca são os fungos do gênero Trichosporon spp sendo as espécies mais comumente associadas a T inkin no pelo pubiano e T ovoides em cabelo e T beigelli A infecção por esses agentes não compromete a pele vizinha é de característica predominantemente assintomática benigna e de pouco contágio A infecção ocorre com bastante frequência em países de climas tropicais e temperados atingindo principalmente adultos jovens em especial pelos axilares pubianos perianal a barba bigode e cabelo É um fungo que normalmente encontrase disseminado em água de lagos e rios normalmente mais estagnada na pele de animais domésticos e alguns autores afirmam que possa constituir a microbiota normal de seres humanos Clinicamente a infecção dos pelos é caracterizada por pequenas nodosidades aderidas de coloração brancoamarelada ou amareloacastanhada aspecto fusiforme e consistência mucilaginosa Facilmente destacados ao toque e visíveis a olho nu ou com auxílio de uma lupa o que facilita grandiosamente o processo de diagnóstico O diagnóstico pode ser realizado a partir do exame físico do pelo por exame direto com KOH 1040 A avaliação dos nódulos revelará a presença de hifas septadas hialinas artroconídeos e poucos blastoconídeos Se realizada em temperatura ambiente a cultura levará de dois a cinco dias para apresentar resultado positivo e a colônia típica apresentará textura glabrosa relevo rugoso a cerebriforme de coloração creme ao branco Figura 49 Piedrae Hortae 119 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA A piedra negra é uma infecção fúngica causada por fungo conhecido pelo nome de Piedrae hortae que atinge preferencialmente os cabelos e raramente outros pelos Clinicamente é bastante semelhante à piedra branca pela presença de nodulações endurecidas no entanto é de coloração escura e também fortemente aderida ao pelo A infecção não acomete a pele vizinha é característica de evolução benigna crônica e de baixo contágio pode ser considerada uma infecção recidivante e atinge principalmente o sexo masculino A infecção ocorre de maneira mais frequente em países de climas tropicais e subtropicais e pode ser adquirida por contato direto com o solo contaminado O diagnóstico é feito de maneira semelhante à investigação de piedra branca Através do exame direto com KOH 1040 se identificarão estruturas de coloração castanha que lembram mosaico artroconídeos associados ou não a filamentos septados Em meio de cultura apropriado e em temperatura ambiente levam de duas a três semanas para crescerem e suas colônias apresentam coloração castanhoescura verdeoliva ou negra textura glabrosa ou velutosa e relevo fortemente apiculado Observação Os agentes responsáveis pela maioria das micoses superficiais são chamados de dermatófitos e sua distribuição é universal sendo mais encontradiços em países tropicais e subtropicais São seres dependentes da queratina proteína que envolve todo o corpo de maneira irregular concentrandose mais em certos pontos nos quais algumas espécies de dermatófitos se localizam com maior frequência Raspado de pelefios de cabelo pelos etc Exame direto com KOH 1040 e tinta eou lâmpada de Wood Malassezia spp Se positivo reportar resultado Se negativo reportar resultado Cultura em Agar Sabouraud TA ou 36 C 1 C Malassezia spp Média de uma a três semanas Figura 50 Algoritmo para isolamento e identificação de fungos causadores de micoses superficiais 120 Unidade II Saiba mais Saiba mais sobre micoses superficiais e cutâneas lendo o artigo MEZZARI A et al Prevalência de micoses superficiais e cutâneas em pacientes atendidos numa atividade de extensão universitária Revista Brasileira de Ciência da Saúde v 21 n 2 p 151156 2017 Disponível em httpsbitly3m9xY4L Acesso em 30 mar 2021 62 Micoses cutâneas aspectos clínicos e laboratoriais das dermatofitoses Infecções por fungos do gênero Microsporum spp Entre os fungos causadores de dermatomicoses destacamse os fungos do gênero Microsporum com duas principais espécies M canis e M gypseu O Microsporum canis é reconhecidamente um dermatófito zoofílico transmitido ao homem por animais domésticos sobretudo por felinos jovens e associado clinicamente a epidermofitíases e algumas situações a onicomicoses micose de unha Outra complicação razoavelmente comum são as infecções do couro cabeludo caracterizadas por grandes placas de alopecia as quais aparecem fluorescentes sob a ação da lâmpada de Wood Para o diagnóstico preconizase o exame direto tal como observado no diagnóstico de micoses superficiais utilizandose do raspado de pele ou fragmento de cabelo barba etc e da análise sob a ação de solução de KOH 1040 e tinta se for solicitada a cultura pode ser feita utilizando de meio de Agar Sabouraud onde as colônias se mostrarão com textura algodonosa de coloração branca e relevo radiado ao exame microscópico será evidenciada a presença de grande quantidade de macroconídeos fusiformes verrucosos de paredes grossas e várias septações variando de cinco a sete é rara a presença de microconídeos Figura 51 Imagem de Microsporum canis 121 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA O M gypseum é também classificado como um dermatófito no entanto diferentemente do M canis é geofílico infectando o homem através do contato com o solo contaminado ou por animais que tenham sido contaminados As lesões típicas da infecção por M gypseum ocorrem preferencialmente em partes descobertas do corpo e raramente parasitam o cabelo ainda diferentemente de seu companheiro de grupo M canis as lesões não apresentam fluorescência quando sob a ação da lâmpada de Wood promovendo uma fácil diferenciação clínica de ambas As colônias de M gypseum crescem com aspectos pulverulento de coloração amareloacastanhadas com grande quantidade de macroconídeos simétricos com três a sete septos paredes finas extremidade arredondada e superfície levemente rugosa microconídeos Infecções por fungos do gênero Tricophyton spp Associadas ao gênero Trichophyton spp destacamse algumas espécies bastante importantes sob aspectos tanto clínicos como epidemiológicos ressaltandose o papel do T rubrum T mentagrophytes e T tonsurans O T rubrum é um fungo antropofílico cosmopolita e um dos agentes mais comuns causadores de dermatofitoses no Brasil e no mundo Tem predileção por infectar pelos unhas e pele e atualmente percebese um aumento na população de indivíduos imunossuprimidos por inúmeras doenças de base que apresentam infecção por esse agente Sob aspectos laboratoriais esse fungo apresentase na forma de colônias algodonosas ou velutosas com pregas radiais e pequena saliência no centro de coloração brancovermelho levando de quatro a sete dias para crescerem Microscopicamente revelase com grande quantidade de microconídeos delicados regulares piriformes Macroconídeos raros alongados em forma de clavacilíndricos com dois a noves septos Figura 52 Hifas numerosas e bastante ramificadas e microconídeos típicos de T rubrum 122 Unidade II O T tonsurans é um parasita antropofílico com alta prevalência na África do Norte e América do Sul a ele associamse lesões semelhantes a eczemas do couro cabeludo Sob aspectos laboratoriais apresentase em colônias de textura algodonosa ou velutosa apiculadas ou cerebriformes de coloração branca crescendo de forma bastante lenta levando de sete a dez dias para seu completo estabelecimento Microscopicamente apresenta numerosos microconídeos dispostos em acládio e de aspecto grosseiro e formato claviforme dilatado e arredondado hifas em raquete e múltiplos clamidoconídeos O Tricophyton mentagrophytes é considerado por muitos autores como a 2a ou 3a causa de dermatofitose É considerado um agente zoofilíco e antropofílico causando epidermofitíases onicomicoses lesões de couro cabeludo e interdigitoplantares Sob aspectos microscópicos apresenta grande quantidade de microconídeos arredondados e agrupados cacho e eventualmente macroconídeos que quando presentes estão em forma de charuto com um a seis septos ligados a hifas hialinas e septadas É comum observar estruturas de ornamentação como hifas em espiral e em raquete A cultura de amostra suspeita e seu crescimento é relativamente rápido de três a cinco dias Podese observar colônias algodonosas de coloração branca a cremeacastanhada de relevo ligeiramente apiculado Infecções por fungos do gênero Epidermophyton spp O E flocossum é o agente etiológico mais relevante desse grupo e agente exclusivo de infecções cutâneas denominadas de pele glabra É reconhecidamente um dermatófito antropofílico e inúmeros autores o apontam como a 4a ou 5a causa de epidermofitíases de grandes pregas Raramente atinge regiões interdigitoplantares e unhas e não se reportam infecções de couro cabeludo As colônias crescem rapidamente levando em torno de três a cinco dias de coloração cáquiesverdeado Pode apresentar radiações partindo do centro da colônia de coloração amareladoesbranquiçadas Microscopicamente apresenta inúmeros microconídios e macroconídios de aspecto claviforme arredondados na extremidade distal e agrupados em um único ponto de inserção na hifa parede fina com dois a cinco septos Infecções por fungos do gênero Candida spp infecções mucocutâneas Leveduras em especial do gênero Candida spp podem ser agentes causadoras de infecções mucocutâneas como é o caso das onicomicoses sobretudo em pacientes que apresentem fatores que os predisponham à tal infecção como doença ou situação de imunocomprometimento São várias as espécies de Candida spp que serão mais bem discutidas quando do tema micoses oportunistas mas é importante ressaltar que a gama de infecções às quais estão associadas vão desde infecções que acometem o trato geniturinário a infecções do SNC e sistêmicas podendo ser associadas a infecções 123 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA comunitárias e hospitalares de difícil tratamento e de prognóstico nem sempre favorável a depender das condições gerais dos pacientes afetados O diagnóstico de infecções por leveduras do gênero Candida spp e de outras leveduras diferentemente das infecções por bolores ocorre fundamentalmente por provas bioquímicas pois as características morfológicas não permitem uma diferenciação segura entre as diferentes leveduras existentes Observação O tratamento de micoses cutâneas não é necessariamente rápido e fácil tudo depende da gravidade da lesão tempo de história clínica e fatores predisponentes do paciente No entanto na maioria das vezes o tratamento pode ser realizado com cremes antifúngicos loções e xampus e até mesmo com o uso de medicamentos de uso tópico e por via oral Saiba mais Que tal conhecer mais sobre o tratamento das micoses cutâneas Para isso leia o artigo ALMEIDA L M M de et al Resposta in vitro de fungos agentes de micoses cutâneas frente aos antifúngicos sistêmicos mais utilizados na dermatologia An Bras Dermat v 84 n 3 p 248255 2009 Disponível em httpsbitly3gm4bFe Acesso em 20 abr 2021 Exemplo de aplicação Conhecer de maneira mais aprofundada a micologia sobretudo no que tange às micoses superficiais e cutâneas pode ser um diferencial para o mercado de trabalho Reflita sobre como muitos biomédicos desconhecem o diagnóstico micológico de maneira mais aprofundada 124 Unidade II Raspado de pele e unha Exame Direto com KOH 1040 e tinta eou lâmpada de Wood Malassezia spp Se positivo reportar resultado Crescimento de levedura identificação de provas bioquímicas Crescimento positivo para filamentoso microscopia Se negativo reportar resultado Se negativo realizar microcultivo para filamentoso Cultura em Agar Sabouraud TA Média de cinco a dez dias filamentoso 1824 h 36 C 1 C levedura Se positivo identificar e reportar resultado Figura 53 Algoritmo para isolamento e identificação de fungos causadores de micoses cutâneas 63 Micoses subcutâneas aspectos clínicos e laboratoriais A maioria dos fungos causadores de micoses subcutâneas habita o solo em condições de total saprofitismo e pode ser encontrada como parasitas de vida livres em animais vegetais e em humanos A infecção em animais e humanos ocorre de maneira acidental normalmente associada a algum tipo de lesão ou trauma ocorrido sobre a pele que acaba por introduzir o fungo na camada subcutânea As infecções normalmente restringemse à área ou sitio de inoculação raramente disseminandose para outros órgãos eou tecidos seja por via hematogênica ou linfática Entre as infecções fúngicas subcutâneas damos principal destaque à esporotricose causada pelo fungo conhecido como Sporothrix schenckii doença de Jorge Lobo ou lobomicose causada pelo fungo Lacazea loboi rinosporidiose causada pelo fungo Rhinosporidium seeberi 125 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA A eporotricose causada pelo Sporothrix schenckii afeta o homem outros mamíferos e aves É caracterizada por apresentarse como uma infecção subaguda ou crônica Distribuise de forma cosmopolita sendo substâncialmente mais frequente em áreas tropicais e climas temperados O fungo é considerado habitante natural de plantas e vegetais em decomposição O processo de infecção iniciase a partir de perfurações arranhões traumatismo podendo atingir indivíduos de qualquer faixa etária grupos étnicos no entanto talvez por questões ocupacionais é mais frequente em indivíduos do sexo masculino Após a instalação do agente por via transcutânea em indivíduo sobretudo imunodeprimido é comum o aparecimento da chamada síndrome cancriforme identificada pela formação de um nódulo primário no local da penetração do agente A infecção pode evoluir eventualmente para as formas cutâneolocalizadas ou dermo localizada ou para formas invariavelmente mais graves conhecidas como cutâneolinfática com tendência a necrose e ulceração e lesão secundária no tronco linfático A forma extrategumentar ou visceral atinge diferentes órgãos sobretudo SNC pulmões fígado baço rins ossos e músculos O diagnóstico laboratorial é favorecido pelas características gerais que esse fungo apresenta como a presença de células leveduriformes ovais globosas ou em forma de charuto Por serem fungos dimórficos ou seja apresentarem a capacidade de variar de forma em função da temperatura a que são submetidos podem ser cultivados em temperatura ambiente A partir de quatro dias de cultura as colônias apresentarão aspecto velutoso de coloração variando do branco ao cinza e escura na periferia Microscopicamente apresentam grande quantidade de filamentos finos associados a conídeos soltos em aspectos de margarida Figura 54 Ilustraçao de Sporothrix shenckii microconideos dispostos em forma de margarida A lobomicose causada pelo fungo conhecido como Lacazea loboi é caracterizada como uma doença de infecção subcutânea subepidermal crônica apresentando lesões queloidais nodulares ulceradas e verrucosas às vezes crostosas e descamativas 126 Unidade II A infecção foi descrita pela primeira vez em 1931 no Recife e desde então vem se apresentando de forma mais frequente em pacientes do sexo masculino com idade entre 20 e 45 anos trabalhadores rurais e pescadores Inúmeras evidências sugerem que a infecção ocorra pela inoculação transcutânea das estruturas fúngica as quais podem ocorrer por transmissão homem a homem ou animalhomemanimal Clinicamente identificase um período de incubação variável com o aparecimento subsequente de uma ou várias pápulas com pequenos nódulos de tonalidade variável As lesões se multiplicam podendo formar placas extensas multilobuladas por continuidade ou autoinoculação As lesões polimórficas ganham características infiltrativas queloidiformes gomosas ulceradas e verrucosas O diagnóstico laboratorial é dificil pois esse agente não cresce em cultura sendo assim o diagnóstico é realizado a partir do exame direto do material coletado por escarificação da lesão secreção ou biópsia Para o exame direto utilizase de solução de KOH 1040 onde evidenciase a presença de grande quantidade de células globosas leveduriformes de tamanho uniforme isoladas ou agrupadas em cadeia contendo de três a nove células Figura 55 Células leveduras globosas típicas de Lacazea loboi A rinosporidiose é uma infecção micótica da camada submucosa crônica de evolução lenta e granulomatosa causada pelo agente Rhinosporidium seeberii É uma infecção cosmopolita com maior incidência na Índia No Brasil as maiores incidências registramse nas regiões Nordeste e CentroOeste Tratase de uma infecção que não se transmite homemhomem nem animaishomemanimais mas sim pela presença destes em seu habitat natural normalmente locais de águas estagnadas poços e açudes sendo os banhos de imersão as principais vias de transmissão da doença A disseminação dos esporos através do vento e da poeira também é considerada Clinicamente a infecção manifestase sob a laringe faringe úvula palato mole traqueia ouvido brônquios uretra vagina reto pele e ossos A lesão clínica pode atingir diferentes classes de animais desde cães a bovinos equinos e aves como os gansos os mais atingidos por essa infecção A manifestação 127 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA clínica é caracterizada pela formação de pólipos vegetantes localizados principalmente nas mucosas nasal e conjutival A infecção progride por continuidade e raramente se dissemina As lesões nasais se instalam dando a impressão ao paciente da presença de um corpo estranho na região acometida Para o diagnóstico preconizase o exame direto com KOH 1040 e o exame histopatológico Microscopicamente apresentam granulações brancas amareladas e múltiplos esporângios com esporangiósporos 64 Micoses sistêmicas aspectos clínicos e laboratoriais As micoses sistêmicas configuramse como um grupo de infecções fúngicas que em sua maioria ou são de evolução muito rápida ou ainda assintomática São raras as situações em cronificação no entanto naqueles em que esta ocorre como doença crônica a principal característica observada é a formação de uma doença com característica granulomatosa Outra característica bastante comum aos fungos causadores de micoses sistêmicas é o dimorfismo térmico ou seja capacidade de alterarem a sua forma de acordo com a temperatura Ao serem cultivados à temperatura ambiente apresentamse em colônias filamentosas formadas por hifas e conídeos e à 3536 C como colônias leveduriformes Fatores como clima características do solo geralmente o solo fofo presença de animais especialmente aves morcegos e eventualmente animais silvestres como macacos e tatus favorecem a manutenção dos agentes em nosso meio outros fatores como ser do sexo masculino e atividades profissionais específicas também parecem colaborar para a transmissão Entre os agentes mais importantes causadores de micoses sistêmicas destacamse Paracoccidioides brasiliensis Histoplasma capsulatum Coccidioides immitis e Blastomyces dermatitidis A Paracoccidioidomicose doença causada pela infecção por Paracoccidioides brasiliensis é uma micose de início pulmonar rápido porém pode provocar manifestações na pele mucosas e gânglios É uma doença que epidemiologicamente se estabeleceu de forma predominante na América Latina sobretudo no Brasil concentrando um maior número de casos na região Sudeste SP a grande maioria dos casos ocorre em indivíduos do sexo masculino normalmente lavradores com idade variando entre 30 e 60 anos Aparentemente o fungo encontrase no ambiente principalmente no solo e na vegetação Também tendo sido isolado em animais silvestres como tatus e macacos e em seus respectivos ambientes como tocas O mecanismo de transmissão e penetração no organismo se dá através das vias respiratórias A Paracoccidioidomicose pode ocorrer de duas formas distintas descritas como Paracoccidioidomicoseinfecção não seguida de doença caracterizada por manifestações compatíveis com os mecanismos de hipersensibilidade do tipo IV pela presença de anticorpos transitórios e pela rápida regressão Paracoccidioidomicosedoença uma infecção primária 128 Unidade II ou reativação na qual as leveduras iniciam um processo inflamatório inespecífico e quando fagocitadas atingem os gânglios linfáticos e do pulmão podendo se disseminar O paciente pode apresentar diferentes quadros de sinais e sintomas como lesões cutâneas granulosas lesões ulcerativas e fibrose em língua linfadenopatia ulceração nasal e lesões úlcerovegetantes quando da forma crônica da doença O diagnóstico é normalmente estabelecido a partir da análise de biópsia de tecidos exsudato das lesões ulcerativas e da pele exsudato ganglionar amostras de LCR urina e outros líquidos corporais Em cultura 35 ºC 1 ºC são isolados como leveduras as quais apresentam paredes grossas esféricas de aproximadamente 10 a 30 µm com múltiplos brotamentos cada uma ligada a um tronco ou colo estreito também conhecido como timão as leveduras tipicamente se agrupam formando o aspecto característico de rodas de leme Também se encontram disponíveis comercialmente testes sorológicos específicos baseados nos ensaios de MendesGiannini e colaboradores Figura 56 Ilustração comparando os aspectos morfológicos de P brasiliensis cultivado em caldo BHI a 37C notar aspecto de roda de leme A histoplasmose é a doença fúngica cujo agente etiológico é o Histoplasma capsulatum O fungo tem como habitat natural o solo fofo de cavernas galinheiros e áreas próximas ao tronco de árvores prefere os ambiente cujo pH tende a ser mais ácido e rico em material orgânico como nas fezes de aves e morcegos Preferencialmente se estabelece em ambientes de clima tropical e temperado No Brasil a região da Serra do Mar abriga o maior número de casos As manifestações primárias da infecção ocorrem nos pulmões pela inalação de conídeos mesmo em indivíduos imunocompetentes podendo se disseminar por via hematogênica ou linfática No desenvolvimento da infecção conídeos são fagocitados nos alvéolos pulmonares e entram em multiplicação causando o que chamamos de pneumonite focal O fungo alcança os linfonodos alveolares complexo pulmonar ganglionar primário e a disseminação ocorre por via linfohematogênica 129 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA As manifestações clínicas variam desde formas assintomáticas a quadros de histoplasmose aguda histoplasmose disseminada e histoplasmose pulmonar Os quadros clínicos da forma disseminada são as lesões ulcerativas em dedos língua e região perianal assim como linfonodos fistulados com pus O diagnóstico de histoplasmose pode ser confirmado pela identificação de pequenas leveduras em processos de brotamento no interior de macrófagos e por cortes de tecidos ou esfregaços corados por técnicas histológicas convencionais como HematoxilinaEosina O crescimento do fungo na forma de bolor é lento o que favorece o diagnóstico por exame direto de amostras de tecido A cultura na forma filamentosa é lenta demorando em torno de 10 a 30 dias o aspecto macroscópico sugere uma teia ou emaranhados finos de cabelo de coloração cinzaacastanhado Microscopicamente podem ser notados micro e macro conídeos grosseiros espiculados granulações externas variando entre 1020 µm Métodos moleculares também podem ser utilizados para o diagnóstico de infecção por H capsulatum com finalidade a se identificar o DNA do fungo em amostras de tecidos e líquidos corporais O diagnóstico molecular seria aplicável a situações em que os fungos corados em amostras colhidas não revelam as formas típicas elucidando de forma definitiva o diagnóstico Testes sorológicos apresentam alta sensibilidade superando 90 nas situações de infecção disseminada ou cavitárias porém sua atuação é limitada em pacientes imunossuprimidos por apresentarem uma resposta humoral caracterizada pela produção de anticorpos diminuída A coccidioidomicose é a doença fúngica causada pelos fungos do gênero Coccidioides spp sendo a espécie mais virulenta a C immitis Os Coccidioides spp são fungos geofílicos habitantes de clima semiárido e desértico encontramse de forma abundante logo que uma estação seca sucede uma estação chuvosa No meio ambiente assim como o Paracoccidioides brasiliensis é bastante encontrado em tocas de tatu A aquisição da infecção também ocorre por via inalatória através da inalação de artroconídeos voláteis e virulentos presentes no solo Não ocorre transmissão homemhomem nem homemanimais nesse caso os animas mais susceptíveis são os cães É uma doença crônica caquetizante relacionada com quadro de anorexia progressiva e comprometimento pulmonar sobretudo com dispneia e tosse Em animais tem sido referida com uma doença 100 letal Seus sinais e sintomas mais frequentes constantemente se confundem com quadros semelhantes a viroses pulmonares ou tuberculoses sendo descritas quatro formas a pulmonar aguda maioria dos casos b assintomática c cutânea primária rara d disseminada grave e rara A blastomicose é a doença causada pelo Blastomyces dermatidis cujo reservatório é o solo e madeira em decomposição É agente de uma infecção crônica granulomatosa purulenta Acomete o homem principalmente trabalhadores de áreas rurais e animais domésticos cães e ocorre com maior frequência na África e na América do Norte 130 Unidade II A infecção ocorre após a inalação de conídeos eou por inoculação traumática Podem surgir lesões nos pulmões pele mucosas ossos articulações e sistema geniturinário São descritas quatro formas de infecção pulmonar aguda a mais frequente e crônica cutânea de evolução crônica cutânea de inoculação primária a mais frequente com formação típica de nódulos e por fim a forma disseminada 65 Micoses oportunistas aspectos clínicos e laboratoriais Por muitas décadas a micologia ficou restrita basicamente ao tratamento das infecções consideradas habituais normalmente causadas por dermatófitos eou fungos causadores de micoses superficiais no entanto com o aumento do número de pacientes susceptíveis principalmente após o surgimento da infecção pelo vírus HIV e o uso indiscriminado de antibioticoterapia e de imunossupressores observase gradualmente um aumento cada vez mais expressivo das chamadas micoses oportunistas Entre as micoses oportunistas de grande importância na atualidade destacase a criptococose uma infecção causada pelo fungo Cryptococcus neoformans O gênero apresenta mais de 19 espécies distintas e a única a causar doença oportunista e ser isolada em meios de cultura a 37 C é a C neoformans a qual ainda pode apresentar duas subespécies ou variantes conhecidas como C neoformans var gatti ou C neoformans var neoformans Em linhas gerais a criptococose é uma doença sistêmica que acomete órgãos profundos pele podendo atingir o SNC O C neoformans var Gatti é típico de regiões tropicais e subtropicais ocorre em indivíduos imunocompetentes e seu habitat são os vegetais especialmente espécies de eucaliptos e madeiras em decomposição assim como podem ser encontrados em troncos ocos de árvores tropicais O C neoformans var neoformans é cosmopolita relacionado a habitats de pombos em ambientes urbanos como também outros habitats de aves em cativeiro no ambiente doméstico Pode estar presente em galinheiros e gaiolas de aves como canários periquitos entre outros e assim como a var Gatti também pode ser encontrado em troncos ocos de árvores tropicais e nativas do Brasil De uma maneira geral podem ser isolados de orofaringe narinas escarro pele e dos interdígitos palmares e plantares como contaminantes ou em situação de colonização transitória A principal via de transmissão é a via inalatória e os fatores de virulência mais associados à espécie são a termotolerância a 37 ºC e a presença de cápsula a qual tem a propriedade de inibir a fagocitose Têm ainda a capacidade de consumir as proteínas que constituem o sistema complemento absorvem e neutralizam opsoninas e anticorpos protetores Podem manifestar três formas básicas distintas sendo elas a pulmonar regressiva caracterizada por lesões primárias ou de reinfecção exógena sem calcificação normalmente assintomáticas b pulmonar progressiva constitui cerca de 10 das formas clínicas sendo caracterizada por uma lesão com mínima reação inflamatória e com sintomatologia inespecífica c disseminada corresponde a maioria dos casos diagnosticados 90 e contempla quadros extra pulmonares devido à disseminação hematogênica 131 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA Apesar de os quadros clínicos citados serem por si só preocupantes em pacientes imunocomprometidos é preocupante sobretudo o desenvolvimento da neurocritococose cuja principal manifestação é compatível com quadros de meningoencefalite subaguda ou crônica com cefaleia occipital intermitente É uma doença progressiva cujas principais manifestações vão desde a redução ou perda de visão passando pelo aumento da pressão intracraniana e hidrocefalia O diagnóstico é estabelecido utilizandose de diferentes materiais biológicos sendo os mais comuns líquor escarro pus ganglionar exsudatos de lesões cutâneas e de mucosas urina e sangue O exame direto é realizado com amostra a fresco utilizandose da tinta nanquim microscopicamente podem ser vistas células arredondadas ou ovaladas isoladas ou com brotamento único constituídas de parede grossa bem refringente sobretudo a cápsula e vacúolos citoplasmáticos A análise macromorfologica depende da cultura do material biológico investigado Normalmente os Cryptococcus spp apresentam crescimento rápido em torno de três dias Por se tratar de leveduras suas colônias são planas ou levemente elevadas brilhantes úmidas e o mucoide de coloração creme Figura 57 Ilustração do exame direto pela tinta da china observar células aredondadas e em brotamento envoltas por halo refringente cápsula típica de Cneoformans A apergilose é uma doença que apesar de seus representantes já terem sido descritos há algumas décadas vem se tornando cada vez mais importante sobretudo relacionada às infecções respiratórias associadas a aparelhos de arcondicionado levando ao que se chama hoje de síndrome dos edifícios doentes a qual se refere a um conjunto de doenças associadas à poluição do ar em ambientes fechados Os agentes etiológicos são os fungos do gênero Aspergillus spp dos quais já foram descritas mais de 300 espécies das quais 20 são consideradas patogênicas ao homem e aos animais As espécies mais importantes são A niger A fumigatus A flavus A nidulans A terreus A versicolor A amstelodami e A candidus São fungos cosmopolitas presentes na natureza em restos orgânicos sobretudo no solo ar e na superfície de seres vivos As manifestações clínicas são variadas como aspergilose cutânea otomicose aspergilar onicomicose aspergilar aspergiloma ou bola fúngica aspergilose pulmonar invasiva sinusite aspergilar aspergilose imunoalérgica e micotoxicose A aspergilose cutânea é resultante de traumatismo ou queimaduras se constitui como lesões polimórficas com nódulos pápulas abcessos subcutâneos granulomas e lesões necrosantes A otomicose 132 Unidade II é uma infecção secundária do conduto auditivo externo de pacientes com lesão eczematosa e sob uso contínuo de antimicrobianos e corticoides associados a esse processo destacamse as espécies A niger seguida de A fumigatus Apesar de não serem fungos queratinofílicos são frequentemente encontrados colonizando unhas traumatizadas sendo responsáveis pelos quadros de onicomicoses nesses indivíduos Fortemente associados a infecções imunoalérgicas são usualmente responsáveis pela aspergilose broncopulmonar alérgica e pela alveolite alérgica extrínseca formas broncopulmonares capazes de causar insuficiência respiratória pela inalação contínua de conídeos E por fim e não menos importantes as micotoxicoses que se configuram por um quadro de intoxicação crônica causada por metabólitos ou micotoxinas O gênero Aspergillus sp produz aflatoxinas capazes de causar quadros de intoxicação com sintomatologia hepática muito associada ao consumo de cereais e sementes oleaginosas contaminadas Para o diagnóstico recomendamse como possíveis amostras clínicas escamas de unha e material subungueal exsudatos lavado bronco alveolar material secretivo pus material de biópsia entre outras O teste recomendado é o exame direto utilizandose de KOH 1020 e tinta As colônias são de crescimento rápido inicialmente brancas passando a azuis verdes amarelas ou pretas cujo reverso parte posterior que revela o micélio vegetativo incolor amarelo ou preto apresentase com aspecto pulvurulento e contorno circular Ao exame microscópico notamse hifas vegetativas ramificadas septadas incolores e refringentes O conidióforo é visto como uma haste simples com extremidade globosa vesícula Na superfície da vesícula saem fiálides e na extremidade de cada uma formase uma cadeia de conídeos de tamanho e cor variável De todas as infecções oportunistas aquelas causadas pelos fungos do gênero Candida spp costumam ser as mais frequentes sendo o seu isolamento sempre relacionado com fezes humanas e ou de animais contaminados No homem é comum encontrarmos o fungo habitando a mucosa digestiva e por contiguidade a mucosa vaginal Como um agente da microbiota normal pode vir a favorecer futuros processos de doença em situações especiais Uma característica especial é que somente as espécies capazes de crescer a 37 ºC são patogênicas ao homem entre elas destacamse Candida albicans Candida tropicalis Candida parapsilosis Candida glabrata Candida krusei Candida rugosa Candida pseudotropicalis e Candida guillermondii São capazes de formação de estruturas filamentosas como hifas que podem dificultar a fagocitose São capazes ainda de produzir metabólitos que podem desencadear reações de hipersensibilidade dos tipos I e IV imunossupressão decorrente da grande quantidade de manana circulante além da produção de enzimas como lipase e proteinase As manifestações clínicas mais comuns são a candidíase intertriginosa uma forma mucocutânea que resulta em números processos como vulvovaginites em que a população de leveduras residentes da mucosa vaginal aumenta e provoca uma vaginite intensa e irritante que pode ser acompanhada por uretrite e disúria simulando infecção do trato urinário ou balanopostite manifestação da esfera 133 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA genital masculina com início na glande podendo apresentarse como um discreto eritema pruriginoso após relação sexual ou aparecimento de vesículas ou pústulas com conteúdo brancocremoso É comum também a produção de exsudação excessiva sobretudo em pacientes obesos etilistas crônicos e diabéticos As lesões são frequentemente encontradas nas regiões inframamárias axilares inguinocrurais e pregas suprapúbicas caracterizamse por formas eritematosas úmidas com bordas mal definidas e escamosas Nas regiões interdigito palmares eou plantares um fator predisponente é a atividade ocupacional relacionada com exposição contínua à água Outra população comumente afetada é a de crianças que usam fraldas Outras manifestações clínicas incluem a onicomicose micose de unha a qual pode levar a uma onicodistrofia com perda total da unha candidíase oral conhecida popularmente pelo nome de sapinho queilites angular ou popularmente conhecida como boqueira manifestação caracterizada por coceira prurido que tende à dessecação e formação de crosta e se manisfesta no ângulo entre os lábios superior e inferior A cultura para espécies de Candida spp é rápida em média de 24 a 72 h entre 35 ºC 1C com formação de colônias de coloração branca à bege Por ser uma levedura a análise microscópica não facilita o processo de identificação razão pela qual se deve utilizar provas específicas para a caracterização em nível de gênero e espécie A habilidade de formar tubo germinativo permite a identificação de C albicans Para a identificação das outras espécies do gênero Candida spp devese além do cultivo realizar as provas de assimilação de fontes de carbono e nitrogênio auxanoGrama e fermentação de fontes de carbono zimoGrama Lembrete Infecções fúngicas oportunistas são causadas por microrganismos que comumente estão presentes no corpo sem causar problemas mas que se aproveitam da debilidade ocasional das defesas do organismo para causar dano Resumo Nesta unidade conhecemos mais sobre a micologia ou seja o estudo dos fungos Pudemos compreender suas características estruturais de nutrição metabolismos e reprodução Reconhecemos os principais agentes fúngicos causadores de doença e como estas são classificadas Também reconhecemos as principais formas de diagnóstico tratamento e prevenção às chamadas micoses superficiais cutâneas subcutâneas sistêmicas e oportunistas 134 Unidade II Exercícios Questão 1 Nas últimas décadas a incidência de infecções fúngicas sistêmicas vem crescendo drasticamente como resultado do envelhecimento da população do aumento do número de indivíduos imunossuprimidos do uso indiscriminado de antimicrobianos e da prática de procedimentos médicos invasivos No tratamento e no diagnóstico de tais infecções devem ser considerados aspectos da morfologia e da fisiologia dos fungos A respeito desses aspectos assinale a alternativa correta A Os fungos são organismos eucariontes heterotróficos e apresentam parede celular com estrutura idêntica à das bactérias B Os fungos normalmente apresentam crescimento ótimo em ambientes de pH neutro ao contrário das bactérias que necessitam de pH ácido para seu desenvolvimento C Os fungos apresentam membrana plasmática rica em ergosterol molécula que não está presente na membrana das células animais e por esse motivo é alvo de ação de diferentes classes de antifúngicos D Os fungos são sempre pluricelulares e organizados de modo a constituir hifas A patogênese das infecções sistêmicas envolve na maioria das vezes a produção de micotoxinas por essas estruturas E O amido constitui a principal reserva energética dos fungos e portanto esses organismos estão mais próximos estruturalmente das células vegetais do que das células animais Resposta correta alternativa C Análise das alternativas A Alternativa incorreta Justificativa os fungos são eucariontes ou seja apresentam núcleo são heterotróficos ou seja não realizam fotossíntese e portanto alimentamse de matéria orgânica apresentam parede celular mas ela é estruturalmente diferente da parede celular das bactérias enquanto a parede celular das bactérias é constituída de peptidoglicanos a parede celular dos fungos é mais rígida e constituída de quitina mananas e glucanas B Alternativa incorreta Justificativa os fungos normalmente crescem mais rapidamente em ambientes de pH muito ácido os quais são desfavoráveis para o crescimento da maioria das bactérias comuns 135 MICROBIOLOGIA E MICOLOGIA BÁSICA C Alternativa correta Justificativa a membrana plasmática dos fungos possui ergosterol em vez do colesterol encontrado nas membranas das células animais Os polienos são uma classe de antifúngicos que se ligam ao ergosterol e como consequência formam poros na membrana das células fúngicas Alguns azóis por sua vez inibem a síntese de ergosterol e assim alteram a fluidez da membrana plasmática desses organismos D Alternativa incorreta Justificativa existem fungos unicelulares denominados leveduras e fungos pluricelulares denominados filamentosos As leveduras podem ser visualizadas sob microscopia óptica comum são Grampositivas e sua reprodução ocorre basicamente de forma assexuada por divisão binária eou brotamentofissão Os fungos filamentosos por sua vez apresentam estrutura constituída por hifas pluricelulares segmentadas ou não que são agrupadas em um micélio Algumas espécies de leveduras e de fungos filamentosos produzem micotoxinas que são importantes nas intoxicações alimentares mas não nas infecções sistêmicas E Alternativa incorreta Justificativa os fungos não realizam fotossíntese e portanto suas reservas energéticas são constituídas principalmente de glicogênio que corresponde à forma de armazenamento da glicose proveniente da matéria orgânica utilizada como fonte de alimentação Por esse motivo os fungos são mais próximos das células animais do que das células vegetais Questão 2 Enade 2010 Fungos do gênero Malassezia estão relacionados ao desenvolvimento de dermatomicose caracterizada pelo aparecimento de manchas de coloração variável bem delimitadas localizadas principalmente na parte superior do tórax e braços pitiríase versicolor Antigamente as leveduras do gênero Malassezia não eram cultiváveis em meios de cultura artificiais Atualmente sabese que esses microrganismos são dependentes nutricionais de um suplemento que deve ser adicionado à formulação de meios de cultura convencionais Nesse sentido para o cultivo de uma amostra biológica com suspeita de Malassezia sp o meio de cultura deve ser suplementado com A Fonte lipídica B Fonte de nitrogênio C Sangue de carneiro D Proteínas à base de soja E Fator V e fator X derivados da hemoglobina Resposta correta alternativa A 136 Unidade II Análise da questão A maioria das espécies pertencentes ao gênero Malassezia coloniza a pele humana A infecção é mais comum em indivíduos púberes e em adultos nos quais é notada maior oleosidade do tegumento Esses fungos não são capazes de sintetizar ácidos graxos de cadeia longa e portanto necessitam de fonte lipídica para proliferação Assim o meio de cultivo deve ser suplementado com azeite de oliva